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      1. 細胞的培養方法
        發布時間:2013-7-8
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        細胞培養方法

        1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快聯系。

        2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。因路途耽擱等因素,細胞會有部分脫落。先把細胞放入培養箱里靜止3小時左右,讓細胞先穩定下,然后在超凈臺中將培養瓶里的培養基吸出一部分,保留大約5-6ml左右在培養瓶里。將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。

        324小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBSHanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之完全脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。

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